一  質量研究項目選擇及初步確定

1、遵循“就高不就低”的原則。

結合所查詢的產(chǎn)品質量標準（原研標準、國內首仿標準、藥典標準）和藥典對具體劑型的要求，確定出質量標準草案。靜脈注射劑處方中加有抗氧劑、抑菌劑、穩(wěn)定劑和增（助）溶劑等，眼用制劑處方中加有防腐劑等，應對相應的輔料進行定量研究。

對于國家藥品標準中收載的項目，首先應考慮選用標準中收載的檢測方法。

2、若有關物質檢測方法多種并存時，建議初步對比研究來確定方法。       如有雜質對照品，用雜質對照品來確認方法的可行性；如沒有雜質對照品，可做一強制降解試驗（需要特別注意的是降解程度為10%左右，在此情況下判定物料平衡才有意義），來初步判定檢測方法的可行性。      判定標準：有雜質對照品時，系統(tǒng)適用性、分離度、有效檢出、精密度及重現(xiàn)性。      無雜質對照品時，系統(tǒng)適用性、降解雜質的有效檢出、物料平衡。3、質量標準草案的初步建立

二  質量標準的方法學驗證

具體分為兩個方面：方法的初步驗證和系統(tǒng)的方法學驗證。

1、質量標準的初步驗證（在中試之前完成）   

①在配合處方工藝篩選檢驗時，就是質量標準初步驗證的過程。例如輔料相容性試驗、參比制劑與小試產(chǎn)品的對比檢驗、小試產(chǎn)品的影響因素試驗等，就可以對方法的可行性進行一個初步的判斷。       

在這時，方法學研究偏重于驗證國家標準中的檢測方法和條件是否適用，重點考察方法的專屬性和準確度。如方法學研究結果顯示方法不適用，應首先分析原因，通過調整處方工藝等以使方法適用；     

在原因無法確認的一些極端條件下，才考慮建立新的檢測方法，但新方法首先要按照化學藥物質量控制研究相關指導原則進行研究，還需通過比較研究證實與原方法具有同等的控制程度。     

因此，原則上不要更換已有的國家藥品標準的色譜條件。當分離度達不到時，可適當調整流動相的比例。     

討論：在前期的處方篩選中，質量標準并沒有真正建立，最終確定的質量標準可能不一樣。這種情況下，認為處方篩選的數(shù)據(jù)仍然可以放入申報資料中，這和處方篩選的目的并不背離，同時也反映出質量研究的開展過程。     

②出具三批小試樣品的檢驗報告書。

2、系統(tǒng)的方法學驗證
在初步驗證的基礎上，需對質量標準進行系統(tǒng)的方法學驗證。方法學驗證所用樣品應采用中試產(chǎn)品。驗證項目（品種及劑型不同檢測項目不同）：① 性狀；鑒別(理化鑒別和光譜鑒別)；② 一般檢查項（按中國藥典制劑通則）；③ 微生度檢測（需進行完整的方法學驗證試驗）；④ 溶出度，有些可以和含量一起驗證；⑤有關物質（需進行完整的方法學驗證試驗）；含量測定（需進行完整的方法學驗證試驗）、衛(wèi)生學方法學驗證。其中重點是有關物質和含量的方法學驗證。

3、有關物質驗證的內容有

（1）系統(tǒng)適用性：     

取樣品，按照有關物質供試品濃度配制溶液，進樣，記錄圖譜。理論板數(shù)應符合規(guī)定，分離度應大于2.0或符合規(guī)定、拖尾因子應0.8-1.2或符合規(guī)定。       

有已知雜質并且雜質對照品可獲得的：配制6份相同濃度的雜質溶液進行分析，該雜質峰峰面積的相對標準差應不大于 2.0%，保留時間的相對標準差應不大于 1.0%。另外，理論板數(shù)應符合規(guī)定，分離度應大于 2.0或符合規(guī)定、拖尾因子應0.8-1.2或符合規(guī)定。

（2）專屬性：空白溶劑干擾試驗、空白輔料試驗、強制降解試驗（高溫、強光、強氧化、強酸、強堿等）、已知雜質定位試驗、峰純度檢查（二極管陣列檢測、質譜檢測）。

（3）檢測限與定量限：
一般采用信噪比法。有已知雜質并且雜質對照品可得的，須用已知雜質對照品同時做。信噪比10：1，為定量限；信噪比為3：1，為檢測限。（4）線性關系試驗：        至少要做五個濃度，如 60%、80%、100%、120%、140%（相對于自身對照濃度）的系列溶液。取該系列溶液進樣，記錄色譜圖，計算回歸方程。      若有已知雜質并且雜質對照品可得的，則取已知雜質對照品另作線性關系試驗，供試品中已知雜質峰面積，應在線性范圍內。（5）精密度：     

只做重復性和中間精密度即可。（6）溶液穩(wěn)定性：（7）準確度：     

一般以回收率試驗進行驗證。無已知雜質的，可不做。有已知雜質的，須做加樣回收試驗驗證準確度。       

討論：有關物質的檢測中，要檢測的是雜質，而不是原料。因此，認為在有已知雜質對照品，并且在標準中對此雜質進行了單獨控制的時候，方法學驗證的內容應圍繞著已知雜質展開，不可以用原料來代替。當無已知雜質對照品時，才用原料代替。       在做強制降解試驗時，建議同時用空白輔料平行做強制降解試驗，特別是含有特殊輔料的，如防腐劑等在紫外有吸收的輔料。關于強制降解試驗，不僅是方法學驗證的內容，而且是對產(chǎn)品的降解途徑、雜質譜及產(chǎn)品穩(wěn)定性判定的過程。       

仿制藥相關指導原則要求仿制品與原研藥應比較雜質譜、雜質量及降解途徑。因此，建議把研試品與原研藥平行進行強制降解試驗（均約10%），這樣可以直觀比較兩者的降解途徑是否一致；降解物是否有差異；檢查方法對兩者的專屬性差別（由于擬定的方法多是原研藥的檢測方法）。平行對比破壞性試驗研究，是評價研制藥和被仿藥質量是否相同的重要手段。

4、關于強制降解試驗中物料平衡的問題

①首先，降解強度為10%左右，不超過10%。②有雜質對照品時，計算出校正因子，將校正因子代入計算。③做峰純度檢查（二極管陣列檢測），二極管陣列檢測的作用不僅是峰純度檢查，另外，還反映出雜質及主藥的總體紫外吸收情況?？梢杂嬎阍诓煌ㄩL處的物料平衡情況（按具體品種而定）。④計算方法：通過與正常樣的總峰面積對比。具體做法：建議取一定量的樣品溶解，作為母液，分別從母液中取一定量進行個因素的降解試驗，再與此母液做的正常樣進行對比，這樣做出的結果才可靠。出具三批中試樣品檢驗報告書。

三 質量對比研究（中試樣品）

質量對比研究是判斷仿制藥與被仿制藥質量 “一致性”或“等同性”的重要方法，可以全面了解產(chǎn)品的質量特征，為仿制藥注冊標準的建立提供依據(jù)。

1、溶出曲線對比研究

一般采用在四種溶出介質（PH1.2、PH4.5、PH6.8.水）中的溶出曲線對比的方法，用f2因子法（f2>50）來比較原研藥和仿制品的曲線相似性。

注意事項：①用于比較的兩種制劑含量差值應在 5%以內。②計算時所選取的時間點間隔無需相等，但兩制劑所取時間點必須一致；且計算時間點應不少于 3個；由于該計算結果有依賴于比較時間點個數(shù)的特性，故在溶出率 85%（緩釋80%以上）以上的時間點應不多于一個。溶出量應按累計溶出量來計算。③除 0時外，第一選取時間點溶出結果的變異系數(shù)應不得過 20%，自第二時間點至最后時間點溶出結果的變異系數(shù)應不得過 10%。如超出，應從儀器適用性或樣品均一性的角度考慮予以解決。2、雜質的對比研究（此項內容可與方法學驗證同做）
對于有關物質檢查，由于原料藥制備工藝、制劑處方工藝的不同，仿制藥的雜質種類和被仿制藥可能不同，因此要求進行對比研究，分析仿制藥和被仿制藥中雜質的種類和含量情況。①可通過強制降解試驗及影響因素試驗的對比研究，來比較仿制藥與原研藥的雜質種類、降解途徑及雜質大小。②對于復方制劑來講，首先應對雜質進行歸屬。采用方法：分別做單個原料、空白輔料及制劑的強制降解試驗。要求如下：      如果研制產(chǎn)品中雜質的含量超出了國家標準規(guī)定，或者研制產(chǎn)品中含有已上市產(chǎn)品中未含有的新雜質，則建議首先通過改進處方工藝降低雜質含量或種類，使不高于被仿制藥。      否則需要分析雜質的安全性并提供有關數(shù)據(jù)，必要時應進行相關的安全性試驗。如果國家標準中未規(guī)定雜質檢查或限度，研制產(chǎn)品的雜質含量不能明顯高于已上市的同品種的雜質實測值，雜質種類也不得更多，否則也需要分析雜質的安全性并提供有關數(shù)據(jù)，必要時應進行相關的安全性試驗。3、檢測方法的對比研究（與方法學驗證同時進行）：

如研究發(fā)現(xiàn)國家藥品標準中一些檢測方法不適用于研制產(chǎn)品，為進一步驗證是檢測方法存在問題，還是研制產(chǎn)品自身存在質量問題，可以采用被仿制藥進行對比研究。

四  質量標準制定

結合對比研究結果、穩(wěn)定性研究結果制定

1）可在國家藥品標準的基礎上，參考國外藥典及參考文獻，增加必要的檢測項目。2）檢測方法：如新建方法與國家藥品標準中收載方法相比無明顯優(yōu)點時，因國家藥品標準已經(jīng)過較長時間和多家單位的驗證，建議仍采用國家藥品標準中收載方法。3）限度：有多種方法可參考時，限度的制定遵循“就高不就低”的原則。4）分別制定貨架期標準及放行標準，即注冊標準和內控標準，寫入申報資料。