1. 前言

在液相色譜分析中，基線是指當色譜柱中僅有流動相通過時，檢測器所產生的響應信號的曲線。當流動相穩定、儀器無干擾時，理想的基線應該是一條近乎直線的信號（允許0.5 mAU以內的微小波動）?；€平穩反映了儀器系統的穩定性，是判斷儀器是否正常運行的重要指標。

基線不平會直接影響檢測結果的可靠性。當基線漂移的幅度超過目標物的信號強度時，微小峰可能會被基線波動掩蓋，導致漏檢或誤判。

同時，傾斜的基線會導致色譜峰積分不準確，尤其是在梯度洗脫中可能會將基線漂移誤判為雜質峰，造成定量分析偏差。

此外，基線異常往往需會導致實驗結果數據不可靠，需要不斷重新進樣分析，這不僅增加了溶劑消耗和時間成本，長期未解決基線問題還可能加速色譜柱劣化或損傷檢測器組件，進一步增加實驗成本。

下面我們總結了一些造成基線漂移可能的原因及其解決方法。

2. 基線漂移的原因及解決方法

1、檢測器故障

（1）檢測器光源老化（氘燈問題）

當檢測器用的“燈泡”（氘燈）使用時間過長時，會光源能量下降。

這就很有可能會導致基線出現噪音大、有明顯雜音（類似電視雪花），或規律性上下波動。我們可以嘗試檢查燈泡亮度，若亮度降到新燈的70%以下，那則需更換一個新燈。

（2）檢測池臟了或有氣泡

檢測池內部殘留樣品、污染物或氣泡，導致光路受阻或光吸收異常?；€不穩定，出現噪音、漂移或異常峰。

出現這種情況我們可以嘗試使用適當的溶劑（例如甲醇、異丙醇、乙腈等）沖洗檢測池。對于頑固污染物，可以使用弱酸（例如 硝酸）清洗，但要注意不要使用鹽酸。

（3）檢測波長沒選對

有時候，基線漂移是因為檢測器沒有設置在其最佳工作波長上。調整檢測器至適合樣品的最大吸收波長處可以改善這一情況。

紫外檢測器的工作原理是通過測量樣品對紫外光的吸收來檢測物質。但流動相中的溶劑本身也會吸收紫外光，其吸收強度隨波長變化的臨界點稱為紫外截止波長。

設定的檢測如果波長太靠近流動相溶劑的吸光區域（比如乙腈在190 nm附近會吸光），溶劑會吸收大量紫外光。

因此我們在設置波長時，需比溶劑的吸光起始波長=至少高20 nm。例如，乙腈的吸光起始波長是190 nm，檢測波長應設為210 nm以上。

2、溫度波動

柱溫或流動相溫度的微小變化都會影響到檢測器的靈敏度，從而引起基線波動。

特別是在使用示差檢測器、電導檢測器以及較低靈敏度的紫外檢測器時尤其明顯——因為溫度變化會改變溶劑的物理性質或光路穩定性，就像用一把刻度會熱脹冷縮的尺子測量物體，溫度一變，“測量工具”自身就不準了。

因此，實驗中需通過恒溫柱溫箱控制色譜柱溫度，流動相可用預熱裝置或熱交換器提前平衡至設定溫度，確保整個流路溫度波動小于±0.5℃，從而消除溫漂對基線的干擾。

3、流動相問題

當基線出現鋸齒狀波動或持續漂移時，我們可以考慮是不是流動相的問題。

未充分脫氣的流動相（尤其乙腈等易揮發溶劑）會產生微小氣泡，導致檢測信號高頻抖動。此外，梯度洗脫初期若未用初始比例流動相充分平衡系統，溶劑比例的驟變可能也會造成檢測器響應劇烈波動。

因此，我們在配制好流動相后，需對其進行超聲脫氣15-30分鐘以去除氣泡；梯度程序啟動前先用初始比例流動相平衡系統至少10分鐘，使流路達到穩定狀態。

4、色譜柱問題

當色譜柱出現問題時，通常會表現為基線持續單向漂移（如持續上升或下降）且柱壓異常升高等。

（1）新色譜柱未活化

如果我們使用的是新色譜柱，那可以考慮是不是新色譜柱未活化。新色譜柱未活化（固定相未充分潤濕）會導致流動相無法均勻通過填料，引發基線漂移。

我們在使用新柱前可以用適當的溶劑（如甲醇）以較低流速（0.2 mL/min）沖洗色譜柱一段時間，確保填料被充分浸潤。

（2）污染物堵塞柱頭

未過濾的樣品殘留可能堵塞柱頭，阻礙流動相流動，進而推高柱壓。因此，所有樣品必須經0.22 μm濾膜過濾，有條件的話可以加裝保護柱攔截污染物。

（3）流動相pH過高，導致色譜柱填料流失

對于大多數硅膠基質的反相色譜柱，適用的pH范圍通常是2～8之間。

如果流動相的pH值超出了這個范圍，則有可能會導致鍵合相水解或硅膠溶解，使得固定相結構遭到破壞、逐漸流失。進而引發基線漂移的問題。

以上就是我們總結的一些有關基線漂移的常見問題及其解決方法，希望對你有幫助！

3. 參考資料

【1】https://wiki.antpedia.com/article-2326581-210

【2】https://www.biomart.cn/news/16/3084880_0.htm

【3】https://lab.jgvogel.cn/c/2020-05-27/1008741.shtml