溶出度系指藥物從片劑、膠囊劑和顆粒劑等固體制劑在規(guī)定的條件下溶出的速率和程度。它是一種模擬口服固體制劑在胃腸道中的崩解和溶出的體外試驗法，是評價和控制藥品制劑質(zhì)量的一個重要指標(biāo)，對評估制劑的批次質(zhì)量、優(yōu)化處方及制備工藝、保證處方工藝等變更前后產(chǎn)品質(zhì)量的一致性有重要作用。

在中國藥典附錄收載的“溶出度測定法”種，對轉(zhuǎn)籃法（一法）和槳法（二法）小杯法（三法）的儀器裝置、測定方法和結(jié)果判定標(biāo)準給予了較詳細的規(guī)定。但是，如何研究和建立一個有效的溶出度檢查方法，是藥品研發(fā)者和生產(chǎn)者更加關(guān)注的問題。

本文參考擬在新版美國藥典中增加的<1092>章節(jié)“溶出度檢查方法的建立和驗證”(The dissolution Procedure: Development and Validation)，結(jié)合筆者的工作體會，重點介紹溶出度檢查方法的建立相關(guān)內(nèi)容。 

1、了解原料藥和制劑的相關(guān)理化性質(zhì)

在建立溶出度檢查方法前，需首先了解原料藥和制劑的相關(guān)理化性質(zhì)。

對于原料藥，有兩方面需要了解，一是藥物在不同pH條件下的溶解度，或在不同介質(zhì)中的溶解度，二是藥物在溶液狀態(tài)下的藥物的穩(wěn)定性。由于溶出度檢查方法要求藥物在選擇的介質(zhì)中可以滿足漏槽條件的要求，了解不同pH條件下的溶解度對介質(zhì)的選擇有重要意義。需要注意的是，當(dāng)通過調(diào)節(jié)介質(zhì)組成（如表面活性劑、pH、緩沖液等）以達到漏槽條件時，需注意評估表面活性劑、pH、緩沖液對藥物溶解性和穩(wěn)定性的影響。

藥物pH溶解度曲線的測定應(yīng)在37±1℃下進行，測定pH1.07.5的水性介質(zhì)中藥物的溶解度。pH值測定個數(shù)需依據(jù)藥物的離子化特性來決定，例如，當(dāng)藥物的pka為35時，藥物的溶解度應(yīng)在pH=pka, pH=pka+1, pH=pka-1, pH=1和pH=7.5處測定，pH值測定個數(shù)應(yīng)可以滿足準確繪制pH溶解度曲線的需要。每個pH處溶解度數(shù)值至少測定，并根據(jù)實驗結(jié)果的偏差情況適當(dāng)增加測定次數(shù)。藥典中收載的緩沖溶液可以用于溶解度測定，如果這些緩沖液的理化性質(zhì)不適合于測定藥物的溶解度，可用其他的緩沖液代替。藥物加入緩沖液后應(yīng)注意驗證溶液的pH值。溶解度測定除傳統(tǒng)的搖瓶法外，若有試驗數(shù)據(jù)證明其他方法可測定被測藥物的平衡溶解度，也可采用其他方法。緩沖溶液中藥物的濃度應(yīng)使用專屬性好且重現(xiàn)性好的實驗方法測定，該方法應(yīng)可以將原型藥物與其降解產(chǎn)物有效分離。

對于制劑，可能影響溶出的重要因素有制劑包衣情況、硬度、脆碎度、崩解時限、處方中增溶劑情況和其他輔料的影響。輔料有時會影響藥物的吸收速度與程度，如大劑量表面活性劑（如聚山梨酯80）通常會增加藥物的溶解度和加速藥物的溶出。而片劑中使用比重較輕輔料量較大或使用蠟質(zhì)輔料時，片劑在介質(zhì)中易漂浮，選擇轉(zhuǎn)籃法測定結(jié)果的均一性較好。

2、溶出儀的選擇

溶出儀的選擇可根據(jù)制劑處方設(shè)計和制劑在體外溶出體系中的實際行為進行選擇。可以選擇藥典附錄中收載的方法，也可以選擇其他方法。例如，一些微球制劑和植入劑可以選擇旋轉(zhuǎn)瓶法（the rotating bottle）或靜態(tài)管（the static tubes）法對溶出度進行檢查，對于采用非藥典附錄進行檢查的，必須提供充分的試驗資料證明所用方法較藥典收載的方法更具有優(yōu)點。

藥典附錄中收載的方法有轉(zhuǎn)籃法（一法）和槳法（二法）。轉(zhuǎn)籃法常用于膠囊，也可用于片劑；槳法常用于片劑，也可用于膠囊。對于小規(guī)格制劑的溶出度檢查，可考慮選用小杯法，介質(zhì)體積可選擇200ml。在某些情況下增加轉(zhuǎn)速（如槳法選擇75rpm－100rpm）對建立一個有意義的溶出度檢查方法是有幫助的。在美國藥典中還收載了轉(zhuǎn)籃法和槳法以外的多種溶出度檢查方法。鑒于這些方法中國藥典附錄均未收載，實際工作中使用不多，在此不再贅述。對于水難溶性藥物制劑的溶出度檢查，為滿足漏槽條件，國外也推薦選擇大體積的溶液（如2L或4L），與中國藥典附錄的要求不同。

對于采用轉(zhuǎn)籃法進行溶出度檢查的，轉(zhuǎn)籃尺寸需符合藥典附錄的規(guī)定，大小應(yīng)均一，篩網(wǎng)孔徑多數(shù)情況下40目。但是，如果有充分的試驗資料支持，必要時也可以對轉(zhuǎn)籃的篩網(wǎng)孔徑進行修改，使用10－20目的篩網(wǎng)。

對于片劑或膠囊溶出過程中轉(zhuǎn)籃篩網(wǎng)被堵塞的，溶出度檢查建議改為槳法。  

在槳法檢查過程中，如片劑或膠囊漂浮于液面，可使用沉降籃（Sinker），以幫助制劑定位于中心位置。對于黏附于容器壁的薄膜包衣片和軟膠囊，也可以使用沉降籃或改用轉(zhuǎn)籃法。對使用非藥典規(guī)定的沉降籃的，需說明原因和詳細的制備方法。同時，需注意提供詳細的試驗資料的說明沉降籃選擇的合理性，包括比較使用或不使用沉降籃，及使用不同沉降籃對溶出行為的影響。由于沉降籃可能對藥物溶出行為產(chǎn)生顯著影響，沉降籃也可能是溶出度檢查方法驗證的一部分內(nèi)容。

3、轉(zhuǎn)速的選擇

對于普通制劑，轉(zhuǎn)籃法轉(zhuǎn)速一般選擇50rpm－100rpm，槳法轉(zhuǎn)速一般選擇50rpm-75rpm。對于干混懸劑，通常選擇25rpm-50rpm。

如果通過對其他轉(zhuǎn)速條件下和上述常規(guī)轉(zhuǎn)速條件下溶出度數(shù)據(jù)比較或其他試驗的支持，證明改變轉(zhuǎn)速是必須的，也可以選擇其他轉(zhuǎn)速。例如，在美國藥典中轉(zhuǎn)籃法轉(zhuǎn)速也有選擇150rpm的；如采用槳法、50rpm發(fā)現(xiàn)制劑存在結(jié)塊、堆積現(xiàn)象，可以將轉(zhuǎn)速提高為75rpm以減少堆積，再經(jīng)過充分研究的基礎(chǔ)上，選擇100rpm也是可以的。但是，轉(zhuǎn)速低于25rpm和超出150rpm通常是不被接受的，因為轉(zhuǎn)速在25rpm以下導(dǎo)致水動力學(xué)行為不一致，而轉(zhuǎn)速在150rpm以上導(dǎo)致水動力學(xué)紊亂。

4、介質(zhì)的選擇

溶出介質(zhì)的選擇部分是根據(jù)藥物溶解度和制劑規(guī)格確定的，以保證符合漏槽條件（定義為至少3倍于藥物飽和濃度體積的介質(zhì)體積）。但是，如果試驗證明所選擇的介質(zhì)更具有分辨力，或有其他充分數(shù)據(jù)的支持（如體內(nèi)外相關(guān)等），也可以選擇不符合漏槽條件的介質(zhì)。

通常情況下，為得到可靠的溶出度數(shù)據(jù)，可以考慮加入表面活性劑，但一般不鼓勵使用水－有機溶劑的溶出體系。如果可以證明單用水性介質(zhì)無法得到體內(nèi)外相關(guān)，而使用水－有機溶劑的溶出體系可以達到體內(nèi)外相關(guān)，也可以使用這類介質(zhì)。

溶出介質(zhì)國內(nèi)一般推薦首選水。但實際上，由于：（1）不同來源的水質(zhì)量不同；（2）水的pH很難檢查，因為每天的水pH不同，即使在測定過程中也可以因原料藥和輔料的原因pH發(fā)生變化：（3）水表面張力可能隨處方中輔料發(fā)生變化。因此，盡管純水被普遍用作溶出介質(zhì)，但純水并不是理想的溶出介質(zhì)。但是，由于水廉價、易得，對于藥物溶出速率與pH無關(guān)的制劑，水是適合的介質(zhì)。同時，如果國家藥品標(biāo)準或藥典標(biāo)準中已選擇水為檢查介質(zhì)，一般不必再改用其他介質(zhì)，除非有確切的原因。

對于普通口服制劑的溶出行為考察需在pH1.2-6.8范圍內(nèi)進行。在方法的建立階段，尚有必要對溶出前后的pH是否發(fā)生變化進行檢查。

對于藥物可以在胃部快速溶解和通透性高的，胃排空時間可能是吸收的限速步驟，對于這類藥物，溶出度檢查主要是證明藥物在胃液條件下可以快速溶出。而對于藥物主要在腸道溶出的，如難溶性藥物、弱酸，選擇較高的pH范圍（如pH6.8的人工腸液）可能是適宜的介質(zhì)。

 “禁食”狀態(tài)和“進食”狀態(tài)也可能對藥物吸收和溶解性產(chǎn)生顯著影響，文獻報道了一些模擬“禁食”狀態(tài)和“進食”狀態(tài)的介質(zhì)，這些介質(zhì)反映了進食后pH、膽鹽濃度、滲透壓的變化，主要用于制劑研發(fā)階段建立體內(nèi)－外相關(guān)性，或用于評估食物可能存在的影響，并不是主要用于產(chǎn)品質(zhì)控。

依據(jù)藥物的溶解性和通透性建立的生物藥劑學(xué)分類體系將與體內(nèi)有一定相關(guān)的溶出介質(zhì)稱為生物相關(guān)性介質(zhì)（Biorelevant medium），而確定溶出介質(zhì)是否屬于生物相關(guān)性介質(zhì)主要依據(jù)制劑的吸收部位以及溶出過程或透過過程是否是吸收的限速步驟。有些時候，生物相關(guān)性介質(zhì)可能與用于注冊申報的溶出條件不同，取樣時間也可能有差異。

5、溶出曲線的測定

在初步確立溶出、轉(zhuǎn)速、介質(zhì)的基礎(chǔ)上，進行溶出試驗。可間隔15分鐘取樣，或間隔5或10分鐘取樣，以產(chǎn)生足夠的樣本量，直至藥物溶出85％以上或達到溶出平臺，得到完整的溶出曲線。

6、方法的完善

對于溶出度檢查10min或更靠前的時間點的各溶出數(shù)據(jù)的RSD大于20％，以及在其后的時間點的溶出數(shù)據(jù)RSD大于10％，溶出結(jié)果就可以被認為具有高度變異性。溶出結(jié)果的高度變異性使得處方、工藝等變化對制劑質(zhì)量的影響無法進行測定和評估。因此，當(dāng)出現(xiàn)此種情況時，需注意分析和研究變異產(chǎn)生的原因，并盡可能降低變異程度。一般而言，產(chǎn)生這種變異的原因可能有兩種，一是制劑處方自身的原因，二是與溶出度檢查方法有關(guān)的原因，如直接崩解后形成堆積物或片劑黏附于容器壁上等。

通過分析研究，并根據(jù)試驗中發(fā)現(xiàn)的現(xiàn)象，如強烈提示是溶出度檢查方法本身造成了這種變異，需設(shè)法對溶出度檢查方法進行修改和完善，包括改變?nèi)艹鰞x，調(diào)節(jié)介質(zhì)，調(diào)整轉(zhuǎn)速，增加介質(zhì)的脫氣等。

需要注意的是，處方和生產(chǎn)過程也可能引起上述變異。例如，制劑含量均勻性差，生產(chǎn)過程不能保證一致，輔料相互作用或干擾等，均可能成為產(chǎn)生上述變異的根源。在排除溶出度檢查方法本身影響的前提下，需對制劑生產(chǎn)過程和處方進行更嚴格地控制。

參考文獻

1 The Dissolution Procedure: Development and Validation. Pharmacopeial Forum. 2004, 30(1):351-363.

2 Guidance for Industry：Dissolution Testing of Immediate Release Solid Oral Dosage Forms.  http://www.fda.gov/cder/guidance/index.htm. 1997-08-25

3 Guidance for Industry：Waiver of In Vivo Bioavailability and Bioequivalence Studies for Immediate Release Solid Oral Dosage Forms Based on a Biopharmaceutics Classification System (I). http://www.fda.gov/cder/guidance/index.htm. 2000-08-31

4 化學(xué)藥品制劑質(zhì)量研究和質(zhì)量標(biāo)準制定指導(dǎo)原則（試行）. 國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布