有機合成中經常會遇到微量樣品的分離，通常情況下，對于少于100毫克的樣品的純化，有以下幾種純化方法：1、直接高效液相制備色譜(Prep-HPLC)純化；2、制備薄層色譜(Prep-TLC, 俗稱爬大板，爬大板有什么奇技淫巧？)；3、微量樣品重結晶（如何重結晶？大量樣品和少量樣品一樣操作嗎？）；4、微量柱層析法。微量柱層析法，相對于上述方法，更加經濟綠色，而且操作方便，通常十幾分鐘就可以完成，相對于爬大板，不用浸泡硅膠，避免產生一些不必要的雜質。對于一些極性不是很大的產物，如果產物沒有紫外吸收，可以優先考慮此方法。但是沒有柱子怎么柱層析呢？實驗室中唾手可得的玻璃滴管就可以用于微量柱層析。

第一步：裝柱

塞入少量棉花，用木棒壓實，不要太緊，只需要防止硅膠漏下就可以。

裝入硅膠，在桌面上輕輕地敲一敲，將硅膠壓實，上方留4-5cm，用于上樣和加洗脫劑。

第二步：潤柱

和過大柱子類似，先用滴管在滴管柱上方加入小極性溶劑，通過不斷加入溶劑，可以靠重力讓柱子潤濕。如果嫌慢，直接用乳膠頭加壓，但是一定要注意，擠壓后千萬不要松開，壓完后拔下乳膠頭再松開，否則會把硅膠和溶劑吸起來。當溶劑開始滴下時，完成潤柱，但是一定要保持上方的溶劑不要干。

第三步：上樣

與平時過大柱子類似，也分為濕法上樣和干法上樣，具體選哪種要根據樣品的性質決定，如果產物極性較大而且溶解度好，可以考慮濕法上樣。但是小編建議用干法，因為本來柱子就短，濕法上樣會影響部分柱效，會導致分離效果不佳。

第四步：洗脫

根據TLC, 選擇合適的溶劑配比【柱層析技術詳解】, 不斷加入溶劑洗脫，利用乳膠頭加壓，溶劑液面保持在硅膠上方，不要壓干。還是要注意擠壓乳膠頭后不要松開，拔下再松開。由于柱子很小可以方便的根據分離難度，調節溶劑梯度。

及時更換容器，接收不同洗脫液，由于量很少小編建議用試管接收比較好，通過TLC或者LCMS確定所需產物。

對于純度要求不高的樣品，盲刮Prep-TLC也可以純化，具體操作和平常的刮大板操作一樣，由于產物沒有紫外吸收，可以在大板的邊上切下來一條。這條板可以通過高錳酸鉀，磷鉬酸或茚三酮之類的顯色劑顯板后判斷大概位置。然后在剩下的板上畫出大概位置刮下來，純度只能看運氣了。如果產物各種顯色劑都不顯板，則只能分段刮下來通過LCMS或HNMR確認產物點，總之，都很麻煩。

參考資料

科羅拉多大學博爾德分校化學和生物化學系，有機化學實驗課。